Daniel J. King

USDA-Servicio de Experimentación Agrícola

Laboratorio de Experimentación Avícola del Sureste 

Athens, Georgia, U.S.A.  

La enfermedad de Newcastle (ND) es una enfermedad de importancia en pollos y otras especies aviares a nivel mundial. La naturaleza y magnitud de la enfermedad varia entre países.  Además de las especies aviares domésticas, el virus de la enfermedad de Newcastle (NDV), agente etiológico de la enfermedad, se sabe que infecta por lo menos a 236 especies de aves (Alexander, 1997). Temas actuales en la epizootiología, control, y cambios en la definición de ND para su reporte internacional por la Oficina Internacional de Epizoóticas (OIE) son materia de este reporte.  Detalles del virus, la enfermedad y de los procesos estándares de laboratorio han sido recopilados por Alexander (1997, 1998).

El virus de la enfermedad de Newcastle (NDV) es miembro de la familia Paramyxoviridae. Múltiples cepas de NDV han sido identificadas.  Todos los aislamientos de NDV, independientemente de la especie de origen, son inhibidos en una prueba de inhibición de hemoaglutinación con antisuero policlonal NDV preparado contra una cepa referencial de NDV,  sus similitudes antigénicas son la base para su clasificación como miembros del serotipo aviar 1 paramyxovirus (APMV-1).  Diferenciación de las cepas de virus entre los serotipos APMV-1 se hace con anticuerpos monoclonales (Alexander et al., 1997) y análisis de secuencia de nucleótidos (Collins et al., 1994; Lomniczi et al., 1998; Seal et al., 1995, 1998). NDV aislados pueden ser diferenciados con NDV antisuero policlonal proveniente de los otros ocho serotipos de paramyxovirus aviares (APMV-2 a APMV-9), existe algo de reacción cruzada entre APMV-1 y APMV-3, un serotipo encontrado frecuentemente en pavos (Alexander, 1998).  En 1995 la posición taxonómica del NDV entre la familia fue cambiado del Género Paramyxovirus a la Subfamilia Paramyxovirinae, Genus Rubulavirus (Rima et al., 1995).  Sin embargo, recientemente la información sobre la secuencia del nucleótido NDV demuestra que el NDV está más relacionado a los miembros de otros géneros en esa subfamilia, los paramyxoviruses y los morbilliviruses, que lo están a la de rubulaviruses en la que los virus de la viruela conforman las especies tipo (Phillips et al., 1998; Seal et al., 1999).

Las manifestaciones clínicas de la enfermedad de Newcastle (ND) permanecen sin cambio alguno desde las descripciones de las formas virulentas de la enfermedad descritas inicialmente en 1926, los reportes de formas menos patogénicas de la enfermedad en los años 1940s y 1950s, y la posterior identificación en los años 1960s de infecciones que eran asintomáticas (Alexander, 1997).  Los signos clínicos observados varían con la virulencia de la cepa de NDV infectante, la especie aviar infectada y la predilección del virus infectante por los sistemas respiratorio, digestivo y/o nervioso.  Las formas clínicas de la enfermedad en pollos son mencionadas a continuación de una manera simple:  Una infección letal aguda para pollos de todas las edades con ocurrencia frecuente de lesiones hemorrágicas en el tracto digestivo es la forma más severa de ND denominada velogénica viscerotrópica (VVND). Una menos severa pero siempre letal con síntomas respiratorios y nerviosos es denominada velogénica neurotrópica (NVND).  Formas menos severas de NVND son debidas a viruses del patotipo mesogénico y formas respiratorias suaves o inaparentes  son producidas por infecciones con virus del patotipo lentogénico.  Infecciones intestinales producidas por aislados de baja virulencia que no producen una enfermedad obvia, han sido nominadas como la forma entérica-asintomática (Alexander, 1997).  Los términos velogénico, mesogénico y lentogénico fueron definidos en la literatura temprana de la enfermedad de Newcastle y describen el tiempo de muerte de los embriones inoculados con NDV, como rápido, intermedio o lento, respectivamente (Hanson y Brandly, 1955).  La muerte rápida, intermedia o lenta de los embriones está correlacionada con la severidad, moderación y suavidad de la enfermedad producida por los patotipos velogénico, mesogénico y lentogénico, respectivamente en pollos susceptibles.  La eliminación de las cepas velogénicas ha sido el foco de la mayoría de los esfuerzos realizados en el pasado.  Las cepas mesogénicas son usadas en la actualidad como vacunas secundarias en algunos países, cambios recientes en la definición de ND efectuados en los estándares de la Oficina Internacional de Epizoótias (OIE) pudieran afectar el futuro uso de vacunas mesogénicas.  Detalles de las nuevas definiciones de la OIE serán tratados más adelante.

El impacto internacional de ND es evidente según los reportes de la OIE de brotes ocurridos durante el año pasado y que han ocurrido en varios continentes en adición a brotes en aquellos países donde la ND velogénica permanecen indígenos. En Europa han ocurrido brotes en pavos comerciales, palomas, pollos de crianza casera y aves ornamentales. En las Américas se han reportado infecciones en aves de recreo y operaciones comerciales.  En Australia los brotes han ocurrido en pollos.  En Africa pollos de los villorios fueron afectados (OIE, 1999). En adición a las pérdidas en productividad causadas por la ND, la ocurrencia de la enfermedad de Newcastle mantiene su impacto sobre el comercio internacional de productos avícolas.  Un brote de la enfermedad de Newcastle causado por un virus velogénico viscerotrópico en una parvada de 48 aves de recreo en los Estados Unidos, California, 1998 resultó en un embargo regional de los embarques de carne de pollo a Rusia, Japón, Estonia, Marruecos, Nueva Zelanda y Rumania, hasta que el brote fuera erradicado.  No se encontraron otras aves infectadas y el brote no estaba relacionado con explotaciones avícolas de tipo comercial, lo desconcertante fue el hecho de que el origen de la enfermedad no pudo ser determinado (Bockma, 1998).  El brote de abril de1999 en pollos en Nuevo Gales del Sur en Australia hizo que China prohibiera todas las importaciones provenientes de ese estado (ProMed, 1999a).

Pruebas de patogenicidad para ND.  La caracterización de la virulencia de las cepas de NDV requiere de evaluaciones de laboratorio debido a que el estado inmunológico y la susceptibilidad de los diferentes hospederos pueden modificar la figura clínica de aquella observada en pollos susceptibles inoculados.  El desarrollo de pruebas estandarizadas ha sido crítico para averiguar la patogenicidad.  El promedio de tiempo de muerte en huevos embrionados (MDT) y el índice de patogenicidad intracerebral (ICPI) en pollos de un día de nacidos fueron inicialmente usados como métodos prácticos para la tipificación y diferenciación de cepas vacunales de NDV de baja virulencia (lentogénico) y de moderada virulencia (mesogénico) (Hanson y Brandly, 1955).  Tiempos largos de muerte embrionaria (>90 hrs) eran correlacionados con baja virulencia y bajos índices de ICPI.  La determinación de un índice de patogenicidad intravenoso (IVPI) en pollos de 6 semanas de edad y SPF se usa para diferenciar los aislamientos de alta virulencia (velogénicos) de los mesogénicos.  En los Estados Unidos la inoculación intracloacal de pollos de 6 a 8 semanas de edad SPF se ha usado para diferenciar el aislamiento de virus VVND (VVNDV) y de virus NVND (NVNDV).  Los virus son clasificados como velogénicos si los pollos inoculados intracloacalmente desarrollan signos de la enfermedad y mueren.  La presencia de lesiones hemorrágicas en pollos infectados con VVNDV diferencia a éstos de aquellos infectados con NVNDV. Los requerimientos para conducir las pruebas de ICPI, IVPI e inoculación intracloacal son pollos libres de patógenos específicos (SPF) susceptibles a NDV y facilidades apropiadas (Alexander, 1998).

Los aislamientos provenientes de palomas han presentado algunas diferencias saltantes en la interpretación de las pruebas estándares para determinar los patotipos.  Los virus de ND aislados de palomas, algunas veces identificados como paloma PMV-1 generalmente tienen un MDT mayor a las 90 hrs, una característica de los virus lentogénicos y ICPIs mayores que 1.0, una propiedad de cepas más virulentas de NDV (King, 1996b).  Existe alguna evidencia de que virus provenientes de otras especies no demuestran su verdadera virulencia hasta después de haber sufrido un pasaje en pollos (Alexander, 1997, 1998). De todas las pruebas de patotipificación, el método de ICPI es considerado como el mejor para predecir la virulencia o potencial virulencia de las cepas de NDV debido a que permite la diferenciación de virus lentogénicos de baja virulencia de los virus mesogénicos y velogénicos más virulentos, por esta razón el ICPI tiene un rol más importante en la diferenciación de cepas  de baja y alta virulencia en la actual definición de ND de la OIE.

Una base molecular para identificar la patogenicidad de NDV ha sido encontrada en la proteína de fusión (F) del virus, una proteína que funciona para fusionar las membranas del virus y la célula permitiendo la entrada del nucleocápsido del virus a la célula.  La región crítica para esta actividad es el sitio de activación de la fusión comprendido en una secuencia de aminoácidos que están unidos para darle la capacidad infectiva al virus.  La secuencia de aminoácidos en virus de baja virulencia está unida a una proteasa presente en un número restringido de células mientras que el sitio de división en virus más virulentos está unido a una proteasa presente en un amplio rango de células y tejidos.  Determinación de la secuencia de aminoácidos en el sitio de unión da una indicación de la potencial virulencia de un aislado (Alexander, 1997).

Epidemiología de la  ND virulenta. La segunda presentación panzoótica de ND ocurrida a finales de los años 1960s e inicios de los años 1970s se caracterizó por la introducción de VVNDV en muchos países a través del comercio de aves mascotas o de compañía principalmente del grupo psittacines que eran portadores del virus (Alexander, 1997). Cuarentena a las importaciones de aves se implementaron y en los Estados Unidos nuevas pruebas de patogenicidad como la inoculación intracloacal de pollos fueron desarrolladas para diferenciar las nuevas cepas “exóticas” de VVNDV de las cepas de NVNDV que eran indígenos en los Estados Unidos hasta principios de los años 1970s.  De esta manera la caracterización de un aislado se basaba en una combinación de la virulencia del virus y la forma clínica de la enfermedad.  A mediados de los años 1980s información epidemiológica proveniente de la caracterización antigénica en base a anticuerpos monoclonales, caracterización molecular del virus y su virulencia determinada por las pruebas de ICPI y IVPI han sido mas importantes en la identificación de los nuevos aislamientos que la definición de la forma clínica de la enfermedad producida en pollos susceptibles. 

La amenaza de la VVND es real y es también una amenaza a la industria avícola.  Aves presentadas para cuarentena y aves confiscadas por las aduanas en los Estados Unidos han sido una fuente para los aislamientos de VVNDV todos los años con la excepción de tres desde 1971 (Preston y Pearson, 1995).  La erradicación de estas aves infectadas ha prevenido la infección en pollos desde que el brote de California fuera erradicado en 1974.  Sin embargo, varios otros eventos ocurridos a partir de principios de los años 1970s han permitido la redefinición de virulencia y confirmado que otras especies aviares son fuentes de cepas de NDV que son potencialmente peligrosas para la avicultura.

La primera evidencia de que virus de moderada virulencia podían adquirir alta virulencia ocurrió en un brote en pollos en Gran Bretaña en 1984.  Caracterización antigénica con anticuerpos monoclonales detectó las similitudes entre los aislamientos provenientes de palomas que morían en los alrededores de las tiendas que vendían alimentos para animales en los muelles de Liverpool y los aislamientos obtenidos de pollos infectados en varias localidades a través de Gran Bretaña (Alexander et al., 1985, 1997).  La similitud antigénica confirmó el enlace epidemiológico entre la enfermedad en palomas y los brotes en pollos, lo que de otra manera no hubiera podido ser evidente usando otras pruebas.  Pasajes subsecuentes de aislados de palomas en pollos demostraron un incremento similar en virulencia en algunos de los aislados, probando que lo ocurrido naturalmente podía ser reproducido experimentalmente (Alexander y Parsons, 1986).

La enfermedad de Newcastle fue la causa de la muerte de cuervos marinos, un ave acuática migratoria, en los Estados Unidos en 1992.  El virus de ND fue aislado de cuervos marinos moribundos y de una parvada de pavos criados abiertamente cerca al lago donde estaban muriendo las aves marinas (Mixson y Pearson, 1992). Síntomas nerviosos y parálisis eran evidentes en ambas especies de aves infectadas.  Los aislados produjeron síntomas nerviosos en pollos inoculados, pero los signos a la mortalidad no fueron tan severos como las que se producen por infecciones con el NDV neurotrópico Texas GB aun después que los aislados fueron repasados en pollos.  Pruebas de ICPI y IVPI aplicadas a los aislados indicaron que eran más virulentos que el tipo mesogénico y menos virulento que el tipo velogénico (King, 1996a).  El análisis de la secuencia nucleótida reveló una identidad muy cercana entre ambos aislados permitiendo de esta manera la confirmación epidemiológica de la fuente del virus infectante en la parvada de pavos.  Adicionalmente, los aislados tenían secuencias de genes de fusión y de matriz similares a las cepas VVNDV a pesar que las típicas lesiones hemorrágicas de VVNDV no fueron evidentes en los pollos inoculados (King, 1996a; Seal et al., 1995). Los resultados demuestran el valor de los análisis de secuencia en estudios epidemiológicos y confirman que los aislados se comportaron como virus virulentos en comparación con las cepas de baja virulencia. También fue evidente que la forma clínica neurológica de la enfermedad no predice la relación filogénica de los aislados con los virus viscerotrópicos.

Los brotes en pollos con una fuente de virus en palomas en Gran Bretaña y de pavos con una fuente de virus en cuervos marinos en los Estados Unidos son ejemplos de las dificultades presentadas recientemente con virus que actúan más como mesogénicos que velogénicos.  Pruebas para diferenciar virus lentogénicos de mesogénicos y  velogénicos en lugar que la diferenciación de velogénicos de los lentogénicos y mesogénicos serán más efectivas en identificar los viruses que son potencialmente virulentos para los pollos.  Por lo expuesto, en la actualidad existe un mayor énfasis en la prueba de ICPI para identificar la virulencia de NDV aislados.

Si bien es cierto que los brotes recientes han sido causados por virus con propiedades de alta o moderada virulencia, tres brotes de ND han sido atribuidos a viruses que aparentemente desarrollaron cepas de baja virulencia.  Los brotes aparecidos en Australia en 1998 (Scott et al., 1999 y 1999 ProMed, 1999b) se debieron a viruses virulentos que según los reportes habían desarrollado de cepas indígenas de baja virulencia, como aquellos reconocidos en Australia desde mediados de los años 1960s.  Una situación similar, un brote en Irlanda en 1990 fue producido probablemente debido a una mutación del NDV de baja a alta virulencia y se sospecha que la fuente fue un aislado de baja virulencia obtenido de aves acuáticas (Collins et al., 1998).  La adquisición de virulencia en cada caso estuvo asociada con cambios en el sitio de activación de la unión de de la proteína de fusión de un virus de baja virulencia al reconocido como de forma virulenta.  La frecuencia de eventos similares en la historia de la enfermedad de Newcastle es desconocida.  El reporte de ocurrencias de mutaciones de una cepa de baja virulencia a una de alta virulencia es raro dadas las oportunidades que existen.  Estas oportunidades incluyen el amplio uso de vacunas lentogénicas, B1, La Sota, F, V4 (Alexander, 1997) y VG-GA (Beard et al., 1993; Villegas y Glisson, 1990) y la continua exposición de las aves a aislados de campo de baja virulencia (King y Seal, 1998; Meulemans et al., 1992).

Evaluaciones epidemiológicas usando anticuerpos monoclonales para detectar diferencias antigénicas y el análisis de secuencia de nucleótidos para detectar diferencias en las secuencias del genoma entre viruses han mejorado ampliamente la capacidad de identificar fuentes potenciales de nuevas infecciones.  Utilizando esta nueva tecnología puede explicar la probable identificación del virus progenitor en los brotes de Irlanda y Australia.  Evidencia experimental de que cambios en el sitio de unión de la secuencia de fusión puede cambiar la virulencia de un aislado ha sido reportada recientemente por Peters et al. (1999).  El sólo cambiar el sito de unión de la secuencia en el NDV La Sota a la secuencia típica de las cepas virulentas, el ICPI incrementó de 0.00 a 1.28.  Los resultados enfatizan la importancia del sitio de unión de la secuencia de fusión y demuestra los efectos de un cambio similar que se cree ocurrió naturalmente en los brotes de Australia e Irlanda, donde cepas de baja virulencia fueron convertidas en formas más virulentas.

El análisis de la secuencia del nucleótido del NDV ha revelado algo de información sobre la evolución del virus.  Todos los nuevos aislamientos en el mundo son similares al grupo filogénico que incluye cepas de baja virulencia como las cepas  Ulster y V4, así como los aislados de los cuervos marinos y pavos en 1992, y los aislados velogénicos viscerotrópicos de aves de compañía identificados durante los años 1970s y los años 1990s.  El linaje que incluye las vacunas B1 y La Sota, el mesogénico Roakin y el velogénico neurotrópico Texas GB no se han diseminado más y no hay nuevos aislamientos similares a este grupo filogénico (Lomniczi et al., 1998; Seal et al., 1998).  El reciente aislamiento de virus parecidos a  B1 y La Sota ha ocurrido en parvadas donde estas cepas eran utilizadas en las vacunas o en aves provenientes de granjas donde existía la historia de que anteriormente se había vacunado (King y Seal, 1998; Marín et al., 1996; Wehmann et al., 1999).

Prevención de la  ND.  Programas de control nacional para la ND varía entre los países.  Estos programas deben considerar ambos conceptos, la forma virulenta de la ND que una enfermedad de preocupación internacional en la lista A de la OIE así como las infecciones con cepas de NDV de baja virulencia que son tratadas diferente en cada país.  Los programas varían desde aquellos en los que no se permite la vacunación y todas las posibles introducciones de la ND son erradicadas a aquellos que usan ambas cepas vivas lentogénicas y mesogénicas así como también vacunas de NDV inactivadas para prevenir la enfermedad proveniente de infecciones de tipo indígenos.  Adicionalmente a las políticas de control de los gobiernos, la situación de prevalencia de la enfermedad y otros factores afectan los programas de vacunación.  Estos factores incluyen aspectos como la disponibilidad de vacunas, inmunidad maternal, otras enfermedades, usos de otras vacunas y los costos (Alexander, 1997).

Eficaces vacunas contra la  ND han estado disponibles en el mercado por años.  Las vacunas contra la ND proporcionan una protección contra la enfermedad en las especies aviares para las que han sido formuladas, pero son menos efectivas en proteger contra la infección y típicamente sólo reducen la cantidad de virus eliminado por el ave infectada.  Reducción de la eliminación del virus va a reducir pero no eliminar la posibilidad de transmisión del NDV a otras aves.  Vacunas vivas lentogénicas conteniendo cepas de NDV B1 o La Sota son usadas universamente en aquellas zonas donde el uso de vacunas vivas está autorizado.  Vacunas formuladas con las cepas lentogénicas V4, F, (Alexander, 1997) Ulster 2C (VAN Eck y Goren, 1991), o VG-GA (Beard et al., 1993; Villegas y Glisson, 1990) han sido igualmente utilizadas.  Vacunas inactivadas formuladas como emulsiones oleosas conteniendo propiolactona – 3 o formalina han sido usadas extensivamente como vacunas monovalentes o como formulaciones polivalentes con otros antígenos de virus aviares inactivados.  Cepas virulentas inactivadas fueron usadas inicialmente, pero recientemente cepas lentogénicas inactivadas como Ulster 2C o La Sota han reemplazado el uso de virus virulentos.  Vacunas oleosas emulsificadas para la inmunización de palomas son preparadas a base del  APMV-1 inactivado.  Los antígenos más importantes del virus son las glicoproteínas de la superficie, la neuraminidasa-hemaglutinina (HN) y las proteínas de fusión (F).  Anticuerpos ya sean a HN o F es neutralización de virus (VN) y anticuerpos a HN pueden ser detectados por inhibición de la hemoaglutinación (HI).  Títulos de VN o HI en suero son considerados como medidas de una respuesta protectiva (Alexander, 1997).

 Si bien es cierto, no existe duda alguna acerca de la eficacia de cualquiera de las vacunas contra la ND usadas en la inmunización de pollos completamente sensibles tal como lo demuestra la protección obtenida contra los retos con los VVNDV o NVNDV, la inmunización de pollos con anticuerpos maternales no es igual de predecible.  Esto es una preocupación particular cuando se trata de crear inmunidad ante la presencia de cepas virulentas de virus indígenos.  La utilización de cepas mesogénicas más invasivas tal como la cepa Roakin y Komarov como una vacunación secundaria luego de una vacunación inicial con una cepa lentogénica tipo B1 o La Sota fue un método utilizado para vencer la inmunidad maternal y sigue usándose en algunos países.  Posiblemente uno de los mejores métodos y técnica más segura es el uso de una vacuna viva B1 en combinación con una vacuna inactivada oleosa-emulsionada al día de edad (Bennejean et al., 1978).  Pollos con anticuerpos maternales que recibieron la combinación de vacunas permanecieron seropositivos y se mantuvieron protegidos al ser retados ocularmente hasta los 60 días de edad.

Dos vacunas recombinadas han sido autorizadas en los Estados Unidos.  Ambas vacunas usan virus de viruela aviar atenuado como vector para HN e injertos de genes de proteína F, los injertos de genes fueron clonados de diferentes cepas de NDV.  Una de las vacunas incorpora el HN y el gene F de una cepa lentogénica de B1 (McMillen et al., 1994)  y el otro incorpora los genes de la cepa velogénica Texas GB (Taylor et al., 1996).  Existen ventajas potenciales para el eficaz uso de vacunas que expresan sólamente el HN y las proteínas  F en lugar del antígeno complemento completo del NDV. Por ejemplo, monitoreo serológico puede ser configurado para diferenciar aves vacunadas de aquellas que han sido infectadas, una característica que sería particularmente útil si las vacunas recombinadas fueran usadas como un componente de los programas de erradicación.  Así mismo, el uso de este tipo de vacunas reduciría el uso de vacunas a base de NDV lentogénicos, el patotipo de aislamiento de campo usualmente recuperados de pollos y pavos con dificultades respiratorias en los Estadios Unidos y Canadá (King, 1998). El costo y los requerimientos de administración individual en lugar de una aplicación masiva son los factores que limitan el uso de este tipo de vacunas por el momento.  Vacunas recombinadas similares utilizando herpes virus de pavo como vector para el NDV HN y genes F han sido estudiados experimentalmente pero no han recibido autorización para su uso comercial.

En un reporte preliminar de una nueva vacuna in ovo que incorpora cepas vivas de B1 o La Sota complementados con anticuerpos neutralizadores de NDV, Haddad et al. (1999) describió la eficacia de la vacuna en pollos SPF y parrilleros comerciales como resultado de un reto con un NVNDV.  Ventajas del uso de esta vacuna precisa ser determinado.

Bioseguridad.  Bioseguridad cubre todos los procedimientos necesarios para prevenir las consecuencias de la enfermedad.  Estos procedimientos incluyen la selección de aves libres de la enfermedad, facilitar los ambientes adecuados y los procedimientos que puedan prevenir la exposición de la parvada a la enfermedad.  La entrada de la enfermedad de Newcastle exógena a parvadas susceptibles donde la enfermedad está bajo control y la persistencia de infecciones de la enfermedad en algunas operaciones donde la enfermedad de Newcastle no ha estado bajo control son debidas, indudablemente, a muchas de las mismas causas.  La diferencia es que la fuente de infección es más rápidamente identificada donde no existe historia de infecciones virulentas de NDV.  Si bien es cierto que no se conocen todos los reservorios de NDV, existen varias fuentes conocidas pertenecientes a otros brotes. El movimiento de aves domésticas infectadas y aves exóticas fue decisivo en la expansión del brote de California en los Estados Unidos en 1971 (Utterback y Schwartz, 1973). El contacto de pollos con aves mascotas infectadas se considera que es la fuente del virus que inicio el brote.  A raíz de este hallazgo se encontró que varias especies de aves, particularmente pericos pueden sufrir de infecciones a VVNDV hasta por un año. (Erickson et al., 1977).  Cuando las aves de una granja se infectan los trabajadores que se mueven entre granjas de la misma empresa (Utterback y Schwartz, 1973) o entre los galpones de una granja (Alexander et al., 1998) pueden rápidamente transmitir NDV a aves susceptibles.  Ratones atrapados durante la limpieza y desinfección de los galpones de una granja mostraron ser portadores del VVNDV (Johnson et al., 1974). Aves libres no fueron un factor en la diseminación del virus en el brote de los Estados Unidos en 1971 (Utterback y Schwartz, 1973),  pero aves migratorias si constituyeron un factor en otros brotes.  En un brote en 1992 en una parvada de pavos criados libremente en los Estados Unidos, el virus fue transmitido de cuervos marinos moribundos en un lago cercano (King, 1996; Seal et al. 1995).  En Gran Bretaña en 1997, aves migratorias pueden haber sido la fuente de virus responsable por ese brote (Alexander et al. 1998).  El alimento fue la causa directa o indirecta de la diseminación del virus a parvadas de pollos en Gran Bretaña en 1984.  El alimento almacenado en los muelles estaba fuertemente  contaminado por palomas muertas por ND. Ponedoras que recibieron el alimento contaminado infectaron mientras que el mismo alimento calentado durante el peletizado no produjo la enfermedad cuando fue administrado a pollos en forma de alimento peletizado (Alexander et al., 1985).  El tratamiento con el calor aparentemente inactivo el virus en el alimento.  La vacunación contra la ND puede reducir la posibilidad de que las aves se infecten, pero una vez que una parvada se encuentra infectada la vacunación puede enmascarar los síntomas y lesiones de una infección a VVNDV (Utterback y Schwartz, 1973).

Shane (1996) ha delineado los componentes de un sólido programa de bioseguridad que él divide en tres niveles: bioseguridad conceptual, bioseguridad estructural y bioseguridad operacional. Bioseguridad conceptual tiene que ver con la localización de la granja para evitar contacto con fuentes potenciales de infección y mantener una óptima producción.  Bioseguridad estructural incluye los planos de las construcciones de la granja, decontaminación de las facilidades, manejo de alimento a granel, diseño de las construcciones para prevenir la entrada de animales y aves extrañas y habitaciones para que los trabajadores puedan cambiarse y colocarse ropa que sólo se usa en la granja.  Bioseguridad operacional comprende todos los procedimientos administrativos y rutinarios que previenen la introducción y distribución de la infección.  Estos procedimientos incluyen cosas como control de tráfico, vacunaciones y programas de vigilancia epidemiológica.  Efectiva bioseguridad simplemente requiere gran atención en todos los detalles relacionados con la producción avícola.

Infecciones con cepas de NDV de baja virulencia.  Las infecciones de NDV virulentas son una preocupación mayor; sin embargo, cepas de baja virulencia pueden y causan pérdidas económicas en ponedoras por baja en la producción de huevos y aerosaclitis en parrilleros.  Descripciones de enfermedades respiratorias tardías entre las 4 y 7 semanas en Australia (Scott et al., 1999) donde no se practica la vacunación son similares a los reportes de enfermedades respiratorias en los Estados Unidos y otros países donde la vacunación es ampliamente usada.  En Australia los aislamientos corresponden a cepas indígenas de baja virulencia mientras que en otros países los aislamientos son parecidos a las cepas de las vacunas que se utilizan (Marín et al., 1996; Wehmann et al., 1999).  Normalmente se espera que la enfermedad clínica sea más severa que la anticipada reacción vacunal en parvadas vacunadas y no vacunadas es debida a una infección con una cepa de NDV más virulenta que las cepas lentogénicas de las vacunas, pero la caracterización de un gran número de aislamientos ha demostrado que este no ha sido el caso.  En un estudio de aislados de campo en pollos en los Estados Unidos y Canadá, todos eran del tipo lentogénico (King y Seal, 1998). En un estudio de 43 aislados en Bélgica sólo uno era de virulencia moderada, los demás eran todos lentogénicos (Meulemans et al., 1992). En un estudio reciente sobre la patogénesis de la ND en pollos SPF, infecciones con cepas lentogénicas no produjeron una sobre infección; sin embargo, ácido nucleico viral fue encontrado en el miocardio y sacos aéreos.  Infecciones lentogénicas pueden comprometer estos tejidos y producir infecciones secundarias y/o disminución en la productividad (Brown et al. 1999).

Definición de ND por la OIE.  Uniformidad en los estándares y una comunicación abierta es altamente importante para la armonización y promoción internacional del comercio de animales y productos de origen animal.  La mayoría de países en Norte y Sur América son países miembros de la OIE (OIE, 1999) y de esta manera están de acuerdo en reportar toda información necesaria para minimizar la expansión de importantes enfermedades que afectan a los animales.  Barcos et al. (1999) ha revisado recientemente las políticas diseñadas para prevenir y tratar emergencias de salud animal que han sido implementadas en países de Sudamérica. Países miembros de la Organización Mundial de Comercio en lo referente a sanidad y fitosanidad son requeridos para que informen los brotes de la enfermedad de Newcastle a la OIE.  Para lograr la uniformidad de estándares entre los países miembros de la OIE, una nueva definición de la ND ha sido aprobada en Mayo de 1999. La nueva definición de la OIE es la siguiente:  

La enfermedad de Newcastle es definida como una infección de las aves causada por un virus del serotipo paramyxovirus aviar serotipo 1 (APMV-1) que reúne uno de los siguientes criterios de virulencia:

a)      El virus tiene un índice de patogenicidad intracerebral (ICPI) en pollos de un día de edad (Gallus gallus) de 0.7 o más.  ó

b)      Múltiple aminoácidos básicos han sido demostrados en el virus (directamente o por deducción) al terminal-C de la proteína F2 y fenilalanina a nivel de residuo 117, el cual es el terminal-N de la proteína F1.  El término múltiple aminoácidos básicos se refiere a por lo menos tres residuos de arginina o lisina entre los residuos 113 a 116.  La falla en demostrar el patrón característico de residuos de aminoácidos tal como se han descrito líneas arriba, requerirá la caracterización del virus aislado por la prueba ICPI. En esta definición, los residuos de aminoácidos son numerados a partir del termino-N de la secuencia de aminoácidos deducida de la secuencia del nucleótido del gene F0, 113B116 corresponde a los residuos B4 a B1 del sitio de unión.  

Ejemplos de los resultados obtenidos de cepas referenciales del NDV que demuestra las diferencias en secuencias entre cepas virulentas y de baja virulencia se expresan en la siguiente tabla.  Se incluyen a modo de comparación los Indices de ICPI de las cepas mencionadas en la tabla. 

Una combinación de los resultados de la inoculación en pollos y análisis de secuencia de nucleótidos se usa en la actualidad para definir cepas de alta patogenicidad de influenza aviar (Alexander, 1996a).  De esta manera, la nueva definición de la ND incluye procedimientos similares a aquellos establecidos actualmente para la evaluación de la virulencia de los virus de influenza aviar, eliminando la inicial e imprecisa definición de la ND que podía llevar a confusión en la interpretación.  A modo de comparación la antigua definición de la OIE decía: La enfermedad de Newcastle (ND) es una enfermedad de las aves producida por cepas del paramyxovirus avian tipo 1, singnificativamente más virulento que las cepas lentogénicas, por ejemplo, las cepas vacunales Hitchner B1 y La Sota.  Algunas especies de aves pueden ser infectadas con cepas virulentas del virus de la enfermedad de Newcastle sin mostrar síntomas clínicos (Anónimos, 1992).

La nueva definición incorpora el ICPI como un criterio de virulencia tal como lo requiere la definición de la Unión Europea de la enfermedad desde 1992 (CEC, 1992) y añade una definición molecular alternativa del sitio de activación de la unión de la proteína de fusión del NDV.  La definición molecular se dedujo del análisis de la secuencia del nucleótido que demuestra las diferencias entre las cepas de baja virulencia y las de mayor virulencia (Seal et al., 1995 y 1998).  Algunos laboratorios tienen facilidades para efectuar el análisis molecular y no pudiendo tener las facilidades para efectuar las pruebas de ICPI.  Secuencias de fusión típicas de virus más virulentos se han encontrado en aislados de provenientes de palomas que mostraban una moderada a baja patogenicidad (Collins et at., 1994). La prueba ICPI es requerida cuando la prueba molecular falla en detectar el patrón característico de los aminoácidos.  La definición final será publicada en el Manual de Estándares de la OIE para pruebas de diagnóstico y vacunas como una revisión del actual capítulo 2.1.15 (Alexander, 1996b) y será la prueba estándar para probar nuevos aislamientos. Una consecuencia del cambio de la definición es la eliminación por la OIE de los términos velogénico, mesogénico, y lentogénico en la caracterización de las cepas de NDV.

Un punto crítico que permanece en la implementación de la nueva definición de la ND es la definición de los procedimientos de importación que establecen el estatus de un país o región entre un país cuando se ha identificado la ND en una especie aviar diferente a la que se va a exportar.  Por ejemplo, el estatus de exportación de pollos que no muestran evidencia de la ND permanece a ser definido si es que en la misma región existe un reporte del aislamiento de NDV de palomas o aves silvestres con propiedades de una cepa virulenta.

Referencias

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